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本文主要闡述樣本性狀、檢測(cè)方法、樣本周轉(zhuǎn)時(shí)間（TAT）及各類(lèi)藥物對(duì)生化檢測(cè)結(jié)果的影響。臨床實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)高度關(guān)注此類(lèi)問(wèn)題，注重患者狀態(tài)和臨床溝通，不斷提高檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

臨床生化檢驗(yàn)在臨床疾病的診治中發(fā)揮了重要作用，在患者疾病診斷、治療指導(dǎo)及療效評(píng)價(jià)等環(huán)節(jié)均有重要的臨床價(jià)值。因此，生化檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性對(duì)臨床醫(yī)生和患者均十分重要。有研究結(jié)果顯示，在臨床反饋不滿(mǎn)意的檢驗(yàn)結(jié)果中，有70%～80%的報(bào)告最終可溯源到樣本質(zhì)量不符合要求，而通常引起樣本質(zhì)量不符合要求的原因通常發(fā)生在檢驗(yàn)前的樣本采集階段或送檢階段。

檢驗(yàn)樣本TAT包括分析前TAT（樣本采集到樣本接收時(shí)間）和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)TAT（實(shí)驗(yàn)室樣本接收到報(bào)告發(fā)送時(shí)間）。實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理除檢驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可靠性管理外，對(duì)影響檢驗(yàn)結(jié)果的各種因素的管理也是必不可少的。TAT的及時(shí)性是影響檢驗(yàn)質(zhì)量的重要因素。

導(dǎo)致TAT延長(zhǎng)的因素是多方面的，樣本采集、樣本運(yùn)送、樣本處理等任意一個(gè)環(huán)節(jié)的錯(cuò)誤操作或低效率都將導(dǎo)致TAT的延長(zhǎng)。加強(qiáng)與醫(yī)院有關(guān)部門(mén)的溝通，對(duì)樣本收集人員進(jìn)行培訓(xùn)、調(diào)整工作時(shí)間、優(yōu)化工作流程可有效縮短TAT，減少因TAT延長(zhǎng)帶來(lái)的誤差。

1.對(duì)血乳酸和血氨的影響

隨著血液放置時(shí)間的延長(zhǎng)，血液離體后，尤其在室溫條件下，紅細(xì)胞會(huì)繼續(xù)進(jìn)行無(wú)氧酵解，產(chǎn)生大量的乳酸；有些實(shí)驗(yàn)室會(huì)使用氟化物/草酸鹽抗凝劑來(lái)抑制糖酵解，短時(shí)間內(nèi)維持乳酸濃度的穩(wěn)定，但隨著放置時(shí)間的延長(zhǎng)，抑制作用減弱，乳酸濃度也會(huì)逐步升高。

氨離子會(huì)因紅細(xì)胞內(nèi)的氨離子濃度是血漿中的2.8倍，如樣本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，氨離子會(huì)因紅細(xì)胞的代謝或破碎而釋放入血，導(dǎo)致血漿中的氨離子濃度升高；血漿中含有的谷氨酰胺和多肽也易水解釋放出氨離子，導(dǎo)致血漿氨離子濃度升高。

因此，用于乳酸和血氨檢測(cè)的樣本不宜放置過(guò)長(zhǎng)時(shí)間，應(yīng)盡快上機(jī)檢測(cè)，以避免因糖酵解和紅細(xì)胞破碎導(dǎo)致的乳酸及血氨升高。

2.對(duì)血糖的影響

血糖檢測(cè)時(shí)樣本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)明顯降低血糖的水平。真性紅細(xì)胞增多癥患者由于過(guò)量的WBC導(dǎo)致樣本中糖分解速率加快導(dǎo)致血糖降低。同時(shí)存在血清樣本血糖結(jié)果穩(wěn)定，而全血樣本隨著放置時(shí)間的延長(zhǎng)，血糖結(jié)果迅速降低的現(xiàn)象。

對(duì)于一般人群而言，血糖檢測(cè)的室內(nèi)變異系數(shù)<2.6%，樣本分析前因素，包括抗凝管的選擇、樣本采集后的轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間及樣本放置的溫度等，對(duì)血糖結(jié)果影響較大。樣本放置時(shí)間過(guò)久（>4 h）及患者紅/白細(xì)胞增多是造成血糖假性降低的主要因素。室溫下血細(xì)胞會(huì)以0.4 mmol/L的速度降低血糖含量，進(jìn)而干擾檢測(cè)結(jié)果。血液采集后1 h內(nèi)分離血清，可以有效延緩血糖降解

常規(guī)生化檢測(cè)是運(yùn)用化學(xué)法、酶法、比濁法及電極法等方法檢測(cè)人體血、尿中各種蛋白質(zhì)、酶及代謝產(chǎn)物等物質(zhì)的水平，并結(jié)合患者的相關(guān)臨床癥狀，為疾病的診斷、治療、預(yù)后提供相關(guān)的診斷依據(jù)。樣本性狀的不同會(huì)對(duì)檢測(cè)方法造成干擾，從而影響檢測(cè)結(jié)果。

1.溶血對(duì)生化檢測(cè)結(jié)果的影響

溶血對(duì)各類(lèi)生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的干擾機(jī)制，包括由于RBC內(nèi)高濃度成分逸出，增加血漿分析物濃度；血紅蛋白（Hb）濃度升高導(dǎo)致的光學(xué)干擾，還可以使431～555 nm波長(zhǎng)附近的吸光度（A）值明顯上升，與試劑成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)等。溶血對(duì)免疫透射比濁法的干擾主要來(lái)自Hb本身A值的干擾。

研究顯示，溶血樣本的IgM、前白蛋白和類(lèi)風(fēng)濕因子（RF）的結(jié)果均低于對(duì)照樣本（P<0.05）；當(dāng)Hb為9.9、29.8 μmol/L時(shí)對(duì)免疫散射比濁法有明顯干擾，而免疫透射比濁法均無(wú)明顯干擾；溶血對(duì)酶法測(cè)定肌酐有明顯的負(fù)干擾，且干擾作用隨著溶血程度的加重而增大，這可能與Hb具有過(guò)氧化氫酶活性，Hb增加會(huì)消耗反應(yīng)中更多的過(guò)氧化氫有關(guān)；5 g/L Hb對(duì)肌酐檢測(cè)的干擾誤差為-14.05%；溶血使Hb 濃度為4.0～7.5 g/L時(shí)，對(duì)血清尿酸檢測(cè)產(chǎn)生負(fù)干擾，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果顯著偏低，平均偏差可達(dá)-10%。溶血對(duì)尿素和Cys C檢測(cè)無(wú)顯著影響。

2.黃疸對(duì)于生化檢測(cè)結(jié)果的影響

樣本中膽紅素通過(guò)本底干擾、光譜干擾和程序干擾3種方式干擾檢測(cè)。當(dāng)結(jié)合膽紅素（CBil）達(dá)到342 μmol/L時(shí)，對(duì)肌酐檢測(cè)產(chǎn)生輕度負(fù)干擾（-5.69%）。非結(jié)合膽紅素（UBil）、CBil和δ膽紅素（δ-Bil）對(duì)尿酸檢測(cè)均有不同程度的干擾，干擾程度依次為CBil>UBil>δ- Bil。CBil干擾較大的原因可能是UBil與葡萄糖醛酸結(jié)合形成CBil之后，分子內(nèi)氫鍵被破壞，分子構(gòu)象發(fā)生變化，一些極性基團(tuán)暴露，使其還原能力增強(qiáng)，故產(chǎn)生的負(fù)干擾較大。

膽紅素對(duì)免疫透射比濁法和免疫散射比濁法檢測(cè)尿白蛋白均呈明顯正干擾，當(dāng)尿膽紅素為16.85 μmol/L（相當(dāng)于“1+”）時(shí)，對(duì)免疫透射比濁法的干擾率為22.94%，對(duì)免疫散射比濁法的干擾率為15.11%。膽紅素可干擾兔抗人單抗，但對(duì)鼠抗人單抗無(wú)影響。

3.脂血對(duì)于生化檢測(cè)結(jié)果的影響

發(fā)生脂濁的血清樣本中含有大量的乳糜微粒和極低密度脂蛋白，其對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾主要是由于乳糜微粒具有光散射的特性，會(huì)產(chǎn)生濁度，從而影響反應(yīng)的A值或使產(chǎn)物的顏色發(fā)生變化。分光光度比色法、免疫透射比濁法、免疫散射比濁法均會(huì)受脂濁的影響，且受干擾的程度與濁度相關(guān)。三酰甘油（TG）對(duì)尿素測(cè)定產(chǎn)生正干擾，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果被高估；對(duì)肌酐和尿酸測(cè)定產(chǎn)生負(fù)干擾，造成檢測(cè)結(jié)果被低估；且TG濃度越高，干擾程度越顯著。通過(guò)超高速離心，吸取下層血清檢測(cè)尿素、肌酐和尿酸，可降低TG的干擾。高濃度TG不會(huì)對(duì)免疫比濁法檢測(cè)Cys C產(chǎn)生明顯影響。

針對(duì)溶血、黃疸和脂血的干擾，各臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)因地制宜，選擇可行的方案來(lái)糾正干擾。對(duì)于溶血，實(shí)驗(yàn)室可通過(guò)設(shè)置適當(dāng)?shù)母辈ㄩL(zhǎng)或采用Hb 單克隆抗體處理樣本，以減少干擾。對(duì)于黃疸引起的干擾，臨床實(shí)驗(yàn)室?？赏ㄟ^(guò)設(shè)置合適的副波長(zhǎng)，或?qū)颖具M(jìn)行預(yù)稀釋來(lái)減少黃疸對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾。高速離心法、血清稀釋法、0.9%氯化鈉溶液稀釋法均可去除乳糜，其中高速離心法去除乳糜的效果最好。

除了常見(jiàn)的溶血、脂血、黃疸等因素外，RF 等自身抗體、M 蛋白、嗜異性抗體等均會(huì)對(duì)不同檢測(cè)方法產(chǎn)生干擾，這些干擾因素可導(dǎo)致待測(cè)物的結(jié)果出現(xiàn)假性升高或降低。

隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，越來(lái)越多的生化項(xiàng)目采用基于抗原抗體反應(yīng)的免疫比濁法檢測(cè)，內(nèi)源性干擾對(duì)免疫檢測(cè)的干擾常被忽視和低估，尤其是在使用全自動(dòng)生化分析儀或免疫分析儀進(jìn)行大批量檢測(cè)時(shí)，很難被識(shí)別，往往在臨床醫(yī)生反饋檢測(cè)結(jié)果與臨床表現(xiàn)不符時(shí)才會(huì)被發(fā)現(xiàn)。

1.RF對(duì)生化檢測(cè)結(jié)果的影響

RF 是目前最常報(bào)道的干擾免疫透射比濁法的內(nèi)源性干擾物質(zhì)。RF 對(duì)免疫透射比濁法的干擾機(jī)制主要為RF與試劑2中包被抗體的膠乳顆粒發(fā)生非特異聚集反應(yīng)，造成反應(yīng)體系的濁度增加。研究顯示，RF對(duì)血清CRP 檢測(cè)有正干擾；患者樣本中的RF 、M 蛋白、嗜異性抗體會(huì)干擾基質(zhì)金屬蛋白酶3 （MMP-3）的檢測(cè)；RF會(huì)干擾Cys C的檢測(cè)，使結(jié)果異常升高。在免疫透射比濁法試劑中，一般在試劑2中含有包被檢測(cè)抗體的膠乳顆粒，嗜異性抗體可結(jié)合該檢測(cè)抗體，發(fā)生聚集反應(yīng)，使?jié)岫壬?，?duì)檢測(cè)造成正干擾。

2.M蛋白對(duì)生化檢測(cè)結(jié)果的影響

M蛋白是由漿細(xì)胞或B淋巴細(xì)胞單克隆惡性增殖產(chǎn)生的一種異常免疫球蛋白。M蛋白可在特定條件下形成沉淀，干擾分光光度比色法、比濁法和免疫學(xué)檢測(cè)方法。M蛋白可對(duì)血糖、γ-谷氨?；D(zhuǎn)移酶、總膽紅素、高密度脂蛋白膽固醇、CRP、免疫球蛋白等項(xiàng)目以及凝血功能實(shí)驗(yàn)、藥物檢測(cè)等產(chǎn)生明顯干擾。與免疫散射比濁法比較，免疫透射比濁法受M蛋白干擾更明顯，其原因可能是免疫散射比濁法在檢測(cè)前先對(duì)樣本進(jìn)行預(yù)稀釋?zhuān)档土薓蛋白的干擾。

3.待測(cè)物濃度過(guò)高對(duì)生化檢測(cè)結(jié)果的影響

當(dāng)待測(cè)物濃度過(guò)高時(shí)，免疫散射比濁法和免疫透射比濁法均可能出現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果假性減低，其主要原因是產(chǎn)生了鉤狀效應(yīng)。研究顯示，RF、心型脂肪酸結(jié)合蛋白、高敏C反應(yīng)蛋白及CRP的臨床可見(jiàn)最高值可超出參考區(qū)間上限的100倍，β2-微球蛋白、RF、視黃醇結(jié)合蛋白、脂蛋白（a）濃度常超出分析測(cè)量范圍上限，這些項(xiàng)目具有較高的發(fā)生鉤狀效應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)，需引起關(guān)注。尿微量白蛋白（mAlb）濃度也經(jīng)常超出分析測(cè)量上限，也應(yīng)引起注意。樣本性狀、內(nèi)源性干擾、鉤狀效應(yīng)等各種干擾因素是影響檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的重要因素。

除飲食、運(yùn)動(dòng)、溶血等因素外，藥物也是較為常見(jiàn)的一種影響檢驗(yàn)結(jié)果的因素。一些臨床常見(jiàn)的藥物可通過(guò)影響機(jī)體內(nèi)氧化還原反應(yīng)導(dǎo)致生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)異常。

1.鹽酸利多卡因

研究顯示，患者在靜脈滴注鹽酸利多卡因后血清出現(xiàn)干片法肌酐結(jié)果明顯高于酶法肌酐結(jié)果的情況。利多卡因通過(guò)血管給藥后能迅速到達(dá)全身，其中10%以原體藥物隨尿排出，90%經(jīng)肝臟細(xì)胞色素P450系統(tǒng)代謝為單乙基甘氨酰二甲基苯胺（MEGX）、甘氨酰二甲基苯胺和2 ，6-二甲基苯胺等產(chǎn)物，其中MEGX在代謝過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生肌氨酸（N-甲基甘氨酸）類(lèi)似物N-乙酰甘氨酸（NEG），可能會(huì)參與肌氨酸的氧化反應(yīng)，生成過(guò)氧化氫，造成肌酐檢測(cè)結(jié)果的假性升高。

2.羥苯磺酸鈣

微血管保護(hù)劑羥苯磺酸鈣對(duì)基于Trinder反應(yīng)的8種酶法檢測(cè)肌酐均可產(chǎn)生明顯的負(fù)干擾，其原因主要與羥苯磺酸鈣的還原性有關(guān)，羥苯磺酸鈣消耗了肌氨酸氧化酶法反應(yīng)過(guò)程中參與Trinder反應(yīng)的過(guò)氧化氫，抑制了生色酚的氧化顯色，使肌酐檢測(cè)結(jié)果偏低。

3.腎上腺素

腎上腺素通過(guò)自身的氧化還原反應(yīng)對(duì)肌酐、尿酸產(chǎn)生負(fù)干擾。

4.還原性藥物

維生素C、多巴胺、多巴酚丁胺、去甲腎上腺素等還原性較強(qiáng)的藥物會(huì)消耗尿酸和肌酐檢測(cè)體系中產(chǎn)生的過(guò)氧化氫，對(duì)尿酸和肌酐檢測(cè)產(chǎn)生負(fù)干擾。采用雙試劑法，在試劑1中加入抗維生素C氧化酶，可消除維生素C的干擾。

5.青霉素

有研究結(jié)果顯示，當(dāng)大劑量靜脈注射青霉素的患者尿液中青霉素>40 000 U/mL時(shí)，干化學(xué)法測(cè)定尿蛋白會(huì)出現(xiàn)假陰性，而磺基水楊酸法會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性。出現(xiàn)此現(xiàn)象的主要原因是由于2種檢測(cè)方法的反應(yīng)原理不同。青霉素是一種有機(jī)弱酸，進(jìn)入機(jī)體后，可以釋放H+，改變機(jī)體環(huán)境的pH值，當(dāng)用干化學(xué)法檢測(cè)尿蛋白時(shí)，酸堿指示劑產(chǎn)生陰離子與帶陽(yáng)離子的蛋白質(zhì)結(jié)合生成復(fù)合物，但青霉素降低了尿液的pH值，沒(méi)有達(dá)到酸堿指示劑的緩沖范圍，無(wú)法引起試紙條的指示劑顏色變化，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果為假陰性。而使用磺基水楊酸法測(cè)定尿蛋白時(shí)，外界環(huán)境的pH值低于等電點(diǎn)，因此尿液中蛋白質(zhì)與磺基水楊酸更易發(fā)生反應(yīng)，增加沉淀物的析出；青霉素本身具有與蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)中的肽鍵類(lèi)似的基團(tuán)，可與磺基水楊酸結(jié)合，產(chǎn)生沉淀。上述2種因素增加了沉淀物的析出，使磺基水楊酸法檢測(cè)結(jié)果為假陽(yáng)性或陽(yáng)性程度高于干化學(xué)法。

6.頭孢替安

有些藥物會(huì)產(chǎn)生與分析物相似的顯色反應(yīng)，從而影響檢驗(yàn)結(jié)果。有研究結(jié)果顯示，頭孢替安會(huì)干擾干化學(xué)法測(cè)定總膽紅素水平，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果升高。這是由于頭孢替安的結(jié)構(gòu)與膽紅素相似，與總膽紅素檢測(cè)干片產(chǎn)生紅色的顏色反應(yīng)，導(dǎo)致出現(xiàn)假陽(yáng)性的檢測(cè)結(jié)果。

除了目前已知的影響檢測(cè)的藥物，臨床上也常常會(huì)出現(xiàn)一些未知藥物的干擾，這給一線(xiàn)的檢驗(yàn)工作人員帶來(lái)了巨大的挑戰(zhàn)，如何識(shí)別出異常的檢驗(yàn)報(bào)告成為檢驗(yàn)科工作的難點(diǎn)。

臨床生化檢驗(yàn)是一項(xiàng)常規(guī)但非常重要的臨床診斷方法，不僅能準(zhǔn)確反饋患者當(dāng)時(shí)的情況，還能更加精準(zhǔn)地對(duì)病情狀況進(jìn)行判斷，從而為臨床下一步治療方案的制定提供可靠的依據(jù)。

在審核臨床檢驗(yàn)報(bào)告時(shí)應(yīng)著重注意“多次結(jié)果比較”及“項(xiàng)目間的邏輯關(guān)系”。掌握臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目的常見(jiàn)影響因素，考慮臨床意義接近的不同項(xiàng)目之間的邏輯關(guān)系，注重多次檢驗(yàn)結(jié)果的比較，采用不同的檢測(cè)方法進(jìn)行復(fù)檢，與臨床溝通并結(jié)合患者病史綜合分析及判斷，可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)存在差錯(cuò)的檢驗(yàn)報(bào)告。